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產品名稱:小鼠胰腺星狀細胞

產品特點:小鼠胰腺星狀細胞公司正在出售的產品小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2 -EDTA(含100mL酶解緩沖液) 10mL SERPINC1 Others Cynomolgus 食蟹猴結腸腺癌細胞 直腸腺癌,HR-8348細胞 人巨細胞白血病細胞株;Mo7e

產品型號:

更新日期:2024-12-17

訪問次數:21

小鼠胰腺星狀細胞的詳細資料:

小鼠胰腺星狀細胞

實驗報告:

小鼠胰腺星狀細胞
一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

細胞簡介:

小鼠胰腺星狀細胞

小鼠胰腺星狀分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。纖維化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星狀細胞(PSC)是胰腺纖維化的主要效應細胞,PSC分離和成功培養是體外研究胰腺纖維化的重要前提。未活性化的PSC胞漿中富含維A脂滴,并表達Desmin蛋白,活化后的PSC則表達α-平滑肌肌動蛋白(alpha-SMA)。PSC具有靜息態與激活態兩種,并分別具有特異的標志物。靜息狀態PSC胞質內富含的脂滴可以被油紅O染成紅色,陽性表達Desmin。激活狀態PSC陽性表達alpha-SMA。油紅O染色發現,原代分離的細胞培養6d,胞漿中仍可見明顯的脂滴,傳代后,橙紅色的脂滴顆粒顯著減少甚至消失。免疫細胞化學染色顯示,細胞接種24h仍然表達Desmin,48hDesmin基本不再表達。培養48h后絕大多數細胞開始表達alpha-SMA,隨著培養時間的增長和傳代次數的增加,細胞表達alpha-SMA,而不再表達Desmin,說明細胞活化。提示PSC接種24h后即啟動了激活過程,至培養第6d大多數細胞激活,傳代后細胞處于高度激活狀態。原代胰腺星狀細胞可作為慢性胰腺炎新藥的細胞篩選模型,目前研究發現:胰腺受損時,在各種刺激因子作用下使胰腺星狀細胞活化,導致細胞形態、功能發生變化,促使基質增生、膠原蛋白的大量生成及不規則沉積。

產品名稱

小鼠胰腺星狀細胞

組織來源

胰腺組織

英文名稱

Mouse Pancreatic   Stellate Cells

產品規格

5×105cells/T25細胞培養瓶

 

方法簡介:

小鼠胰腺星狀細胞

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀采用膠原酶制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠胰腺星狀經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息:

小鼠胰腺星狀細胞

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

小鼠胰腺星狀細胞

注意事項:

小鼠胰腺星狀細胞
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產品:
小鼠胰腺星狀細胞

天青B   1g

AzureB   5g

   50KU

Baciacin   250KU

小鼠1,4,5-0酸肌醇(IP3)試劑盒 96T/48T

Rat cardioophin 1 (CT-1) ELISA Kit 大鼠心肌營養素1(CT-1)試劑盒

Humaeversei-iodothyronine,3ELISAKit 人反三甲狀腺原(3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanC-Polypeptide,CP試劑盒人C多肽(CP)試劑盒規格:96T/48T

組織CSF1R激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

HumanProteinCELISAKit人蛋白C(ProteinC)試劑盒規格:96T/48T

GHR重組大鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 Protein

HLA-DR(human leukoyte Antigen DR 0.5mgHLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原

TFRC重組人 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 蛋白 Protein

IFNB1 Protein Human 重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白

IL10RB Protein Mouse 重組小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 (Fc 標簽)

HLA-DR(human leukoyte Antigen DR 0.5mgHLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原

IFNB1 Protein Human 重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白

GHR重組大鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 Protein

IL10RB Protein Mouse 重組小鼠 IL10RB / IL10R2 蛋白 (Fc 標簽)

TFRC重組人 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 蛋白 Protein

小鼠胰腺星狀細胞大鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)試劑盒 ,英文名: CRH ELISA Kit

Mouse 17 hydroxycoicosteroid (17-OHCS) ELISA Kit 小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)試劑盒

ELISA 小鼠腦肽(mouse BNP)  進口分裝

CLIAKitforLIFELISAKit大鼠白血病抑制因子

通用型HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴增試劑盒20

ELISAKitAflatoxin霉毒素


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