產品名稱:小鼠牙周膜成纖維細胞
產品特點:小鼠牙周膜成纖維細胞公司正在出售的產品小鼠胚胎成纖維細胞;PA317 PCSK1 Others Human 人 PCSK1 / NEC1 人細胞裂解液 PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 RK2 Others Canine 狗 kB / RK2 人細胞裂解液
產品型號:
更新日期:2024-12-17
訪問次數:19
小鼠牙周膜成纖維細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
小鼠牙周膜成纖維分離自牙周膜組織;牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙)是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質內,另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內;牙周膜內有神經、血管、淋巴和上皮細胞等。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的牙周膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細胞(PLFs)作為牙周膜的主體細胞,是牙周膜主要的間質細胞,它不僅具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復及再生過程?,F在,利用牙周膜細胞建立體外模型,已經成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段。
產品名稱 | 小鼠牙周膜成纖維細胞 | 組織來源 | 牙周膜組織 |
英文名稱 | Mouse Periodontal Ligament Fibroblast Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠牙周膜成纖維采用膠原酶-聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的小鼠牙周膜成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產品:
小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素10(IL-10)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
小鼠白介素11(IL-11)ELISAKit ELISA. 96T/48T
中文名稱 方法 規格
小鼠血管生成素4(ANG-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat secretory immunoglobulin A (sIgA) ELISA Kit 大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)試劑盒
HumanCholicacidELISAKit 人膽酸(Cholicacid)試劑盒 96T/48T 進口分裝
rabbitTissue-typePlasiminogenActilyse,t-PA試劑盒兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒規格:96T/48T
油類高效液相色譜法定量試劑盒20次
MouseIerferonγ,IFN-γELISAKitKit小鼠γ干擾素(IFN-γ)試劑盒規格:96T/48T
POSTN重組人 Periostin / POSTN 蛋白 Protein
胰島素樣生長因子2(IGF2)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2)
NA重組甲型流感 H5N1 神經酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
CD40 Protein Human 重組人 CD40 / TNFRSF5 蛋白
FLAA Protein M.viridifaciens 重組單核細胞增生李斯特菌 flagellin / flaA 蛋白
胰島素樣生長因子2(IGF2)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2)
CD40 Protein Human 重組人 CD40 / TNFRSF5 蛋白
POSTN重組人 Periostin / POSTN 蛋白 Protein
FLAA Protein M.viridifaciens 重組單核細胞增生李斯特菌 flagellin / flaA 蛋白
NA重組甲型流感 H5N1 神經酶 (Neuraminidase / NA) (高活性) Protein
小鼠牙周膜成纖維細胞大鼠單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)試劑盒 ,英文名: MCP-1 ELISA Kit
Porcine apolipoprotein B100 (apo-B100) ELISA Kit 豬載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒
ELISA 小鼠抗利尿激素/血管加壓素(mouse AVP/ADH) 進口分裝
CLIAKitforLPAb-IgA(HumanLegionellaaibodyIgA)ELISAKit人軍團菌抗體IgA
通用型DNA克隆試劑盒(不包括內切酶)10次
ELISAKitIL-1雞白介素1
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