產品名稱:小鼠臍動脈平滑肌細胞
產品特點:小鼠臍動脈平滑肌細胞公司正在出售的產品人真皮成纖維細胞-胎兒總RNAHDF-f NA CNE(人鼻咽癌細胞) 人腎癌細胞;A498 ICAM1 Others Human 人 ICAM-1 / CD54 人細胞裂解液 CCDC134 Others Human 人 CCDC134 人細胞裂解液 IFNL3 Others Human
產品型號:
更新日期:2024-12-17
訪問次數:20
小鼠臍動脈平滑肌細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
小鼠臍動脈平滑肌分離自臍帶組織;它是臍動脈的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產物即代謝廢物和營養物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養物質從胎盤運送給胎兒。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,同時從臍帶中分離臍靜動平滑肌細胞方法相對成熟,使得體外培養的臍動脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。臍動脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。
產品名稱 | 小鼠臍動脈平滑肌細胞 | 組織來源 | 臍帶 |
英文名稱 | Mouse Umbilical Artery Smooth Muscle Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介:
實驗室分離的小鼠臍動脈平滑肌采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的小鼠臍動脈平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠臍動脈平滑肌體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產品:
大鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)檢測試劑盒 ,英文名: Col Ⅳ ELISA Kit
Mouse caspase 3 (Casp-3) ELISA Kit 小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)檢測試劑盒
MouseKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHumahrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit人纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物
通用型羊約尼氏病/副桿菌(Mycobacteriumparatuberculosis /Johne’sdisease)試劑盒20次
ELISAKiti-PTH大鼠全段甲狀旁腺素
ICAM1重組大鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 Protein
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CA5A重組人 CA5A / CA-VA 蛋白 Protein
GBP2 Protein Human 重組人 GBP-2 / GBP2 蛋白
ERBB2 Protein Mouse 重組小鼠 HER2 / ErbB2 / CD340 蛋白
HisX6 聚組標簽蛋白 0.5mgHisX6 聚組標簽蛋白
GBP2 Protein Human 重組人 GBP-2 / GBP2 蛋白
ICAM1重組大鼠 ICAM-1 / CD54 蛋白 Protein
ERBB2 Protein Mouse 重組小鼠 HER2 / ErbB2 / CD340 蛋白
CA5A重組人 CA5A / CA-VA 蛋白 Protein
小鼠白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human hyaluronidase (HAase) ELISA Kit 人透明質酸酶(HAase)檢測試劑盒
HumanypsinELISAKit 人(ypsin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanCalcitonin,CT檢測試劑盒人降鈣素(CT)檢測試劑盒規格:96T/48T
中性紅復染試劑盒50次
Humansolubleprotein185,sp185/HER-2ELISAKit人可溶性蛋白185(sp185/HER-2)檢測試劑盒規格:96T/48T
小鼠臍動脈平滑肌細胞兔子Ⅱ(FⅡ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子C反應蛋白(CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子內皮型合成酶3(eNOS-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子酯轉移蛋白(CETP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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