產品名稱:兔大隱靜脈內皮細胞
產品特點:兔大隱靜脈內皮細胞公司正在出售的產品RM-1(小鼠前列腺癌細胞) 786-O(人透明細胞癌細胞) tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3 SRA01/04細胞,人晶體上皮細胞系 人高轉移卵巢癌細胞,HO-8910PM細胞 人晶狀體上皮細胞裂解物
產品型號:
更新日期:2024-12-12
訪問次數:32
兔大隱靜脈內皮細胞的詳細資料:
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介:
兔大隱靜脈內皮分離自大隱靜脈;大隱靜脈起于足背靜脈弓內側端,經內踝前方,沿小腿內側緣伴隱神經上行,經股骨內側髁后方,進入大腿內側部,與股內側皮神經伴行,逐漸向前上,在恥骨結節外下方穿隱靜脈裂孔,匯入股靜脈,其匯入點稱為隱股點。有5條屬支:旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內側淺靜脈和股外側淺靜脈,它們匯入大隱靜脈的形式多樣,相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結扎時,須分別結扎、切斷各屬支,以防復發。大隱靜脈內皮細胞對維持大隱靜脈動態平衡起著重要作用。它們合成、分泌凝血和纖溶系統的激活因子和抑制因子、影響血小板粘附和聚集的調節因子;大隱靜脈內皮細胞還釋放控制細胞增殖和調節血管壁緊張度的分子。
產品名稱 | 兔大隱靜脈內皮細胞 | 組織來源 | 大隱靜脈 |
英文名稱 | Rabbit Great Saphenous Vein Endothelial Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介:
實驗室分離的兔大隱靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔大隱靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔大隱靜脈內皮體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。
9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產品:
大鼠N-甲基-D-天氡酸離子能谷酸受體1(GRIN1)檢測試劑盒 ,英文名: GRIN1 ELISA Kit
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CLIAKitforcANCA(humanai-neuophilcytoplasmicaibody)ELISAKit人抗中性粒細胞胞漿抗體
細菌β-半乳糖苷酶活性超敏熒光定量檢測試劑盒20次
Ratadiponectin,ADPELISAKit大鼠脂聯素(ADP)檢測試劑盒規格:96T/48T
KIT重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 (Fc 標簽) Protein
GAP-43 ( Growth associated protein-43 0.5mgGAP-43 ( Growth associated protein-43 ) 生長相關蛋白-43(抗原)
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IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白
SDC1 Protein Mouse 重組小鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白
GAP-43 ( Growth associated protein-43 0.5mgGAP-43 ( Growth associated protein-43 ) 生長相關蛋白-43(抗原)
IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白
KIT重組大鼠 KIT / c-KIT 蛋白 (Fc 標簽) Protein
SDC1 Protein Mouse 重組小鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 蛋白
CD40LG重組人 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽) Protein
豚鼠內皮型合成酶(eNOS)檢測試劑盒 ,英文名: eNOS ELISA Kit
Human low density lipoprotein (LDL) ELISA Kit 人低密度脂蛋白(LDL)檢測試劑盒
Monkeyadrenomedullin,ADMELISAKit腎上腺髓質素(ADM)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBigET(MouseBigEndothelin)ELISAKit小鼠大內皮素
細菌尿素酶(UREASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Rabbitlipoproteinα,Lp-αELSIAKit兔脂蛋白α(Lp-α)檢測試劑盒規格:96T/48T
兔大隱靜脈內皮細胞山羊壞死因子α(TNF-α)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊胰島素樣生長因子1(IGF-1)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊血小板衍化生長因子(PDGF)檢測試劑盒 組裝/原裝
山羊生長激素釋放多肽(GHRP)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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