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① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

產品名稱：人肝星狀細胞

英文名稱：Human Hepatic Stellate Cells

組織來源：肝臟組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

人肝星形分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝星形細胞（HSC）又名肝貯脂細胞、貯存細胞、竇周細胞、Ito細胞等，是肝臟細胞外基質的主要來源。HSC在激活后可進一步轉化為肌成纖維細胞樣細胞，各種可導致肝纖維化的因素均將HSC作為終靶細胞。正常情況下，HSC處于靜止狀態，當肝臟發生炎癥反應或受到機械刺激等損傷時，HSC的表型由靜止型轉變為激活型，激活的HSC可通過增生和分泌細胞外基質參與肝纖維化的形成及肝內結構的重建，此過程也是肝纖維化的中心環節。肝星形細胞分布于肝臟的Disse間隙內，是合成、分泌細胞外基質的主要來源，在肝纖維化的發生中處于重要地位。肝星形細胞是肝臟的間充質細胞，約占肝臟細胞總數的8%-13%。作為肝臟合成細胞外基質的主要細胞群，肝星形細胞不僅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等細胞外基質成分，合成一定量的膠原酶以維持正常的基底膜結構，還能通過其突起的收縮參與肝竇的微循環調節。此外，肝星形細胞能通過合成肝細胞生長因子、胰島素樣生長因子、表皮生長因子等促進肝細胞增殖和肝再生。

公司實驗室分離的人肝星形采用混合酶灌流消化、低速離心、密度梯度離心制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人肝星狀經α-SMA、Desmin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

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小鼠單核細胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit 大鼠Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)試劑盒

Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 人心肌營養素1(CT-1)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBcellreceptor,BCR試劑盒人B細胞受體(BCR)試劑盒規格：96T/48T

植物蔗糖合成酶(sucrosesyhase)活性比色法定量試劑盒20次

Humahioredoxieductase,xRELISAKit人硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒規格：96T/48T

ART4重組小鼠 ART4 / CD297 蛋白 Protein

補體成分4a(C4a)重組蛋白 Recombinant Complement Component 4a (C4a)

COX5B重組人 COX5B 蛋白 Protein

FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白

TEK Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Tie2 / TEK 蛋白 (Fc 標簽)

AEG-1 peptide AEG-1抗原 0.5mgAEG-1 peptide AEG-1抗原

FH Protein Human 重組人 Fumarate Hydratase / FH 蛋白

BLMH重組小鼠 BLMH / Bleomycin Hydrolase 蛋白 Protein

CHODL Protein Rat 重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (Fc 標簽)

FCGR2B重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein

人肝星狀細胞大鼠血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶1(ADAMTS1)試劑盒 ，英文名： ADAMTS1 ELISA Kit

Mouse embryonic stem cell line MESPU30 (M30) ELISA Kit 小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)試劑盒

MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAkit 小鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanc-junELISAKit人c-jun

細胞CDK7/CYCLINH激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitCAMK2大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用