產品名稱：大鼠結腸黏膜上皮細胞
產品特點：大鼠結腸黏膜上皮細胞公司正在出售的產品CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細胞裂解液 BALL-1人B淋巴細胞急性白血病細胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清 CM-R070
產品型號：
更新日期：2024-12-10
訪問次數：32
大鼠結腸黏膜上皮細胞的詳細資料：
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞簡介：
大鼠結腸黏膜上皮分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環形、外縱行兩層平滑?。?，外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細胞是機體內外環境的重要屏障，持續暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發揮關鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發生、性質和強度。探討正常結腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養方法，為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關疾病建立合適的細胞模型。
產品名稱 | 大鼠結腸黏膜上皮細胞 | 組織來源 | 結腸組織 |
英文名稱 | Rat Colonic Mucosal Epithelial Cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠結腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的大鼠結腸黏膜上皮經Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項：
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。
5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產品：
大鼠酶原顆粒膜糖蛋白(GP2)檢測試劑盒 ，英文名： GP2 ELISA Kit
Mouse insulin like growth factor 2 (IGF-2) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)檢測試劑盒
RatAmylinELISAKit 大鼠胰淀素(Amylin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGelsolinELISAKit大鼠凝溶膠蛋白
細胞甘油三酯(iglyceride)含量酶連續循環反應比色法定量檢測試劑盒20次
Ratsolubleclusterofdiffereiation14,sCD14ELISAKit大鼠可溶性CD14(sCD14)檢測試劑盒規格：96T/48T
HA重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 0.5mgPAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子
ICOSLG重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 Protein
ESM1 Protein Human 重組人 ESM1 / Endocan 蛋白
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽)
PAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子 0.5mgPAI-1 纖溶酶原激活物抑制因子
ESM1 Protein Human 重組人 ESM1 / Endocan 蛋白
HA重組甲型流感 H15N2 (A/Australian shelduck/Western Australia/1756/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
ANGPT2 Protein Human 重組人 Angiopoietin-2 / ANG2 蛋白 (Fc 標簽)
ICOSLG重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 Protein
小鼠壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human platelet aibody IgG/M/A (PA-IgG/M/A) ELISA Kit 人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)檢測試劑盒
Humandeubiquitinatingenzyme,DUBELISAKit 人泛素分解酶(DUB)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforABP(HumanAndrogenBindingProtein)ELISAKit人雄激素結合蛋白
合成酶(NOS)總活性終點比色法定量檢測試劑盒50/100次
MouseN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKit小鼠N端前腦素(-proBNP)檢測試劑盒規格：96T/48T
大鼠結腸黏膜上皮細胞小鼠癌標志物CA125ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠癌標志物-CA153ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胃腸癌標志物CA199ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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