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細胞名稱  人大細胞肺癌細胞；NCI-H661運輸
形態(tài)特性 上皮細胞樣

生長特性 貼壁生長

特征特性 此細胞株源自一43歲患有大細胞肺癌的男性白人的淋巴結(jié)。 缺乏產(chǎn)生粘液和鱗狀分化的亞顯微結(jié)構(gòu)和生化證據(jù)。 其表達的p53 mRNA易于檢測，明顯高于正常肺細胞的水平，與此同時，沒有出現(xiàn)總體性的結(jié)構(gòu)DNA崎變，它們可以說明存在點突變或很小的變異。 角蛋白和波形蛋白纖維染色陽性，神經(jīng)絲三聯(lián)體蛋白陰性。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%

傳代方法 消化3-5分鐘。1：

2。3天內(nèi)可長滿。  

傳代情況 PN5

?

細胞分類：
*種：
人大細胞肺癌細胞；NCI-H661運輸是凍存產(chǎn)品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不這種，也較少使用這種方式，因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：
是我們復(fù)蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，進口來源，保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
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MFC肉湯 MFC Broth 用于大腸菌群的濾膜法檢測

細菌L型增菌液 65 用于L型細菌增菌培養(yǎng)

馬丁培養(yǎng)基250g/瓶用于真菌的培養(yǎng)incubationmedia馬丁培養(yǎng)基250g/瓶用于真菌的培養(yǎng)

菌落總數(shù)檢測培養(yǎng)基-

Campy-Cefex添加劑  Campy-Cefex Supplement  2毫升×10支  添加于200ml CAMPY-CEFEX瓊脂基礎(chǔ)中

多項目尿液化學(xué)分析控制品  多項目尿液化學(xué)分析控制品  10毫升×6支

高鐵血紅蛋白參比液(100g/L)  Cyanomethemoglobin reference solution  10毫升×8支

高鐵血紅蛋白參比液(150g/L)  Cyanomethemoglobin reference solution  10毫升×8支
人大細胞肺癌細胞；NCI-H661運輸HSP20  熱休克蛋白-20多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

HSP105  熱休克蛋白105多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

HSP10/CPN10  熱休克蛋白10多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

HSP1/Protamine P1  P1多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

HSL/LIPE  荷爾蒙敏感脂肪酶多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

HSJ2/DNAJB6  熱休克蛋白J2多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

HSF1  熱休克因子1多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

HSD3B7  滋養(yǎng)層細胞抗原3β7多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

HSD3B1  滋養(yǎng)層細胞抗原3β-HSD多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

HSD3a  羥基類固醇脫氫酶3α多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

HSD17B6  17-β-羥脫氫酶6多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

HSD17B3  羥類固醇脫氫酶17β3多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*
【培養(yǎng)指南】
人大細胞肺癌細胞；NCI-H661運輸對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
【細胞凍存】
待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行人大細胞肺癌細胞；NCI-H661運輸凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
【復(fù)蘇的原則】
快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶，對細胞造成損害。復(fù)旦細胞庫全國各地均可發(fā)貨，全國統(tǒng)一價格，本公司出售的所有細胞僅供科研使用。