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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒測(cè)定中影響因素較多
點(diǎn)擊次數(shù):662 更新時(shí)間:2018-01-08

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意的問(wèn)題,包括樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、溫育等問(wèn)題,希望對(duì)你有用處。elisa試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點(diǎn),深受廣大用戶朋友的喜愛(ài)。然而,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,也需要注意很多問(wèn)題。對(duì)此,需要遵守一些規(guī)則,才能更好地進(jìn)行實(shí)驗(yàn),取得較好的實(shí)驗(yàn)成果。Elisa方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。在Elisa測(cè)定中影響因素較多,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。下面,我們一起看下需要注意的問(wèn)題:
1.樣品稀釋
一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過(guò)大量試驗(yàn)確定,以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會(huì)產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽(yáng)性。
2.試劑盒平衡 
Elisa中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠,樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。 
3.樣品和試劑的混勻
在稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗(yàn)的均一性。 
4.加樣
加樣是一項(xiàng)很重要的步驟。加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。
5.溫育
溫育是ELISA測(cè)定中影響測(cè)定成敗zui為關(guān)鍵的一個(gè)因素。ELISA作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。
6.洗板
固相免疫測(cè)定技術(shù)是一種非均相免疫測(cè)定技術(shù),需以洗滌操作將特異結(jié)合于固相的抗原或抗體與反應(yīng)溫育過(guò)程中吸附的非特異成份分離開(kāi)來(lái),以保證ELISA測(cè)定的特異性。洗液盡量不要溢出孔外;加洗液后要靜置1分鐘,甩去板孔中洗液后,一定要大力拍干;及時(shí)更換吸水紙,尤其是拍過(guò)酶標(biāo)記物的吸水紙一定要棄去,否則可能影響試驗(yàn)結(jié)果。
7.抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒顯色
顯色一定要控制時(shí)間,根據(jù)試劑盒說(shuō)明操作即可。一般來(lái)說(shuō),顯色時(shí)間過(guò)短,結(jié)果偏低;顯色時(shí)間過(guò)長(zhǎng),空白增高或者非特異性顯色增加。
Forskolin    40mg    66575-29-9     佛司可林標(biāo)準(zhǔn)品
Midodrine Related Compound A    40mg    3600-87-1     米多君相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
    40mg    256-81-5    賽庚啶相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
    40mg    54779-58-7     反苯環(huán)丙胺相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
    40mg    5586-89-0     苯環(huán)丙胺相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
    40mg        相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
    40mg        碘帕醇相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品
8-Bromotheophylline    400mg    10381-75-6    8-溴標(biāo)準(zhǔn)品
Acetaminophen    400mg    103-90-2    標(biāo)準(zhǔn)品
Carbidopa    400mg    38821-49-7    標(biāo)準(zhǔn)品
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒

 

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