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小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa檢測試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。
人乳腺癌細胞;MDA-MB-231
人乳腺癌細胞;MDA-MB-435S
人乳腺癌細胞;MDA-MB-453
人惡性多發(fā)性畸胎瘤細胞;NTERA-2
人卵巢畸胎瘤細胞;PA-1
人胰腺癌細胞;PANC-1
人成骨肉瘤細胞;Saos-2
人神經(jīng)母細胞瘤細胞;SH-SY5Y
人卵巢腺癌細胞;SK-OV-3
人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
人橫紋肌肉瘤細胞;A-204
人肺腺癌細胞;Calu-3
人腎癌Wilms細胞;G401
人肝癌細胞;Hep G2 [HepG2]
人急性早幼粒白血病細胞;HL-60
人骨肉瘤細胞;HOS
人慢性髓系白血病細胞;K562
人前列腺癌細胞;LNCaP
人乳腺癌細胞;MCF 7B
人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4
人小細胞肺癌細胞;NCI-H209
黑人Burkitt淋巴瘤細胞;RAJI
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS
人B淋巴細胞瘤細胞;RAMOS(RA.1)
人腦瘤細胞;SF126
人腦瘤細胞;SF763
人腦瘤細胞;SF767
人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1
人腎上腺皮質(zhì)癌細胞;SW-13
人結(jié)直腸癌細胞;T84
人急性單核細胞白血病細胞;THP-1
人神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤細胞;U251
人組織細胞淋巴瘤細胞;U937 [U-937]
人胃腺癌細胞;BGC-823
人低分化肺腺癌細胞;GLC-82 [GLC82]
人喉癌上皮細胞;Hep-2
人纖維肉瘤細胞;HT-1080
人絨癌細胞;JEG-3
人耐VP16絨癌細胞株;JEG-3/VP16
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3/VP16-IL-2
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFa
人急性T淋巴細胞白血病細胞;Jurkat, Clone E6-1
人神經(jīng)母細胞瘤細胞;BE(2)-M17
人乳腺癌細胞;MDA-MB-157
人成骨肉瘤細胞;MG-63
人小細胞肺癌細胞;NCI-H446
人多發(fā)性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]