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諾如病毒GⅠ型、GⅡ型RNA核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)注意事項:
1. 實驗過程中穿戴工作服和乳膠手套,使用移液器,試驗產(chǎn)生的所有廢棄物及時處理。
2.嚴格按照操作步驟操作,試劑配制和加樣等步驟請嚴格按照說明書要求在冰上操作。
3.反應(yīng)液中的成分對光敏感,應(yīng)避光保存。反應(yīng)不需要用到的試劑應(yīng)避免解凍;反應(yīng)液使用前在室溫下離心30秒。
4.反應(yīng)結(jié)束后,擴增管請置于密封袋內(nèi)丟棄,當日清理,開蓋易造成氣溶膠污染,禁止開蓋。
5.本試劑檢測靈敏度高。為了防止污染,實驗要分區(qū)操作。 1)一區(qū):樣本制備區(qū)。2)第二區(qū):擴增及產(chǎn)物檢測區(qū)?!锓謪^(qū)之間好進行物理性隔離,避免人為因素造成的污染。
6.不同批號試劑請勿混合使用,在有效期內(nèi)使用。
組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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