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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒制作感受態(tài)細(xì)胞大全方法
A液1M,MnCl2
B液:1M,HEPES,pH=6.2-6.8,用無菌水配,配后不需滅菌;
C液 稱取CaCl2 0.10g,KCl 1.18g,全部轉(zhuǎn)入細(xì)口試劑瓶,然后加入46ml三蒸水,輕輕振蕩使所有組分充分溶解。將瓶塞蓋上并用牛皮紙、棉線包扎,然后放入滅菌鍋121℃高壓滅菌備用。
取1管B液(0.6ml),全部加入C液(46ml)中,混勻后,再用1ml移液器加入3.3ml A液,混勻冰浴即可使用。
ELISA試劑盒挑取2-4個(gè)形態(tài)飽滿的單菌落接種于裝有100ml SOB 培養(yǎng)基的三角瓶,37℃劇烈振蕩(300 rpms)培養(yǎng)3-4小時(shí),將培養(yǎng)溫度調(diào)至18℃劇烈振蕩(3280 rpms)培養(yǎng),其余與普通感受態(tài)差不多,每管加入4ml TB緩沖液,輕輕振蕩,使菌體重新懸浮,加入280ml DMSO(可用國產(chǎn)分析純),混勻后分裝入1.5ml EP管,冰上靜置15分鐘。用紗布將所有裝有感受態(tài)的EP管包好,用棉線系好后放入液氮中速凍,在液氮中靜置12小時(shí)以上。取出感受態(tài)放入-70℃超低溫冰箱備用。抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒效率非常高,一般可到10*8,好時(shí)可到10*9,特別適宜于大片段與文庫構(gòu)建及珍貴材料的連接轉(zhuǎn)化。
含量測定 50mg 100242-200402
含量測定 50mg 100244-200502
檢查用 50mg 100247-199601 鈉
含量測定 100mg 100248-200802 12
含量測定 100mg 100249-200902
含量測定 100mg 100252-200703 亞鈣
含量測定 50mg 100253-200201
抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒
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