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a)抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒洗液不要溢出孔外,以免污染相鄰的孔,特別是每次洗板的前兩遍,若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔,其造成的交叉污染的孔是洗不掉的,背景肯定會(huì)增高。
b)特別注意:設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的時(shí)候要考慮實(shí)驗(yàn)孔的位置,保證甩掉洗液時(shí),空白孔、低濃度孔或陰性對(duì)照組在上面或一側(cè)或分開。同時(shí)注意甩掉洗液的動(dòng)作翻轉(zhuǎn)(從正上方旋轉(zhuǎn)120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉(zhuǎn)來甩液體!甩出后以直線方式補(bǔ)2-3次甩出液體。
c)抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒用干凈的濾紙,不要用衛(wèi)生紙,因?yàn)榧?xì)小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底,導(dǎo)致洗板不干凈,結(jié)果偏高或偏低,重復(fù)孔的數(shù)值也會(huì)相差很大。
d)每次拍板不要重復(fù)在一個(gè)地方拍,特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過輕,否則拍不干凈,拍板很用力不會(huì)對(duì)蛋白有什么影響。但注意不要太重,以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下,zui后一次一定要扣干凈。
e)不能減少洗液體積、洗板時(shí)間和次數(shù)。洗板時(shí)間太短,洗板效果不佳。抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒延長(zhǎng)洗板時(shí)間和增加洗板次數(shù)可以使背景更干凈。